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2×BB Taq PCR Mix(不含染料)图片
产品货号:
SN0042
中文名称:
2×BB Taq PCR Mix(不含染料)
英文名称:
2×BB Taq PCR Mix(without dye)
产品规格:
5mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
简要说明:

本制品包含高纯度BB Taq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系,浓度为2×,只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增,可有效扩增3kb以内的DNA片段。体系中不含电泳指示剂,扩增完成后需加入DNA Loading buffer后再上样进行电泳检测。使用本制品扩增的PCR产物3'端带有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于TA克隆。本制品适用于常规PCR扩增。



产品特点:
  • 操作简单:2×Mix,只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增。
  • 极快的延伸速度:10~15s/kb。


产品组成:
组分规格
2×BB Taq PCR Mix(不含染料)1mL×5
说明书1份

保存:-20℃,有效期1年。

注意事项:
  • 请使用高质量的模板进行扩增。
  • PCR Mix应避免反复冻融,短期内多次使用可置于4℃保存。
  • 本制品不可用于细菌16S鉴定。


使用方法:
  • 按下表配制PCR反应体系(冰上操作)
    成分25μL体系50μL体系终浓度
    2×BB Taq PCR Mix(不含染料)12.5μL25μL
    引物1(10μM)1.0μL2.0μL0.4μM
    引物2(10μM)1.0μL2.0μL0.4μM
    模板DNA根据需要加入合适的量
    ddH2O25μL50μL-
      模板推荐量:
      基因组DNA:10~1000ng;
      质粒DNA:1~30ng;
      cDNA:1~2μL(不超过PCR反应总体积的1/10)。
    • 以上为推荐的模板使用量,实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异,可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系。
  • 建议的PCR条件
    步骤温度时间循环数
    预变性95℃3min1
    变性94℃25s30~35
    退火55~64℃25s
    延伸72℃10~15s/kb
    终延伸72℃1~5min1
    -4℃Hold-


常见问题:
  • 扩增无产物或产物量少?
    • 模板降解或模板纯度差:电泳检测模板质量,使用高质量模板。
    • 引物不合适:优化引物设计。
    • 退火温度不合适:设置退火温度梯度,摸索合适的退火温度。
    • 循环数过少:适当增加5~10个循环。
    • 延伸时间不足:复杂模板可适当增加延伸速度至20~30s/kb。
  • 扩增出现非特异条带或弥散带?
    • 引物特异性差:优化引物,避免非特异性条带以及引物二聚体的扩增。
    • 模板过量或纯度差:减少模板量,使用高质量模板。
    • 退火温度过低:适当提高退火温度或使用Touchdown PCR程序。
    • 循环数过多:减少循环数至25~30个循环。

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